產品名稱: | PEIMax轉染試劑PEIMax MW40000、PEI Max MW40000,PEIMax 40K、PEI Max 40K,Polyethylenimine、線性聚乙烯亞胺、線性PEI、轉染級別PEI |
規格: | 100mg,1 g, 1 ml |
貯存條件: | 避光,-20度 |
CAS號: | PEI MAX - Transfection Grade Linear Polyethylenimine Hydrochloride (MW 40,000) CAS Number: 49553-93-7 MaxFect Transfection Regent CAS Number: 49553-93-7
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物理性狀: | 固體為白色或近白色粉末。 1 mg/mL水溶液透明,接近無色或略顯黃色。 |
用途:
| 細胞培養級別的質粒轉染。本產品僅供科研使用,不能用于臨床治療。
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PEI MW25000和PEI Max MW40000區別: | PEI MAX MW40000 ( Polysciences#24765-1)是線性化聚乙烯亞胺PEI MW25000(Polysciences#23966-1)的升級產品,是一種功能更為強大的高效瞬時轉染試劑。PEI MAX MW40000與PEI 25000的區別在于: 1)wanquan水解(去乙酰化) 2)PEI 25000的鹽酸鹽形式,具更高的水溶特性 3)含更長連續性乙烯亞胺片段,其轉染效率比PEI MW25000提高11%以上。
4)PEI MAX 40K比PEI 25K更易于使用,并且更高效。PEI 25K轉染溶液通常需要幾個小時才能制備,而PEI MAX 40K可以在兩個小時內轉化為即用型可溶性溶液。 5)PEI 25K含有4-11%的殘余丙酰基,可防止聚合物主鏈與DNA強烈結合。PEI MAX 40K去乙酰化的結構意味著每批產品的表現始終如一,穩定性更強。 |
儲存濃度:
| 1 mg/ml
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工作濃度:
| 3 ug/ml 左右,每ml培養基加入3 ul儲存液。
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PEI轉染試劑配置方法: | 1. 稱取100mg PEI轉染試劑,溶解于100ml無菌水中。配置的終濃度是1 mg/ml. 2. 緩慢使用稀鹽酸,調節PH至7.0,一定不要讓pH過了,一旦過了效果就不好了。 3. 使用0.1um或者0.22um無菌過濾器,過濾除菌。 4. 分裝成每管500ul-1ml,-20度,保存,備用。 5. 使用超純水配置,器具一定要滅菌干凈,防止支原體污染。
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適用范圍: | 本產品適用于絕大多數真核細胞質粒轉染:HEK 293,293T,A549,B16F10,HeLa,Hepa 1-6,Hepa-1c1c7,HepG2,BHK-21,C2C12,C6,CHO-K1,COS-1,COS-7,Daoy,DU 145,K562,KB,LL/2(LLC1), LNCaP-FGC,MCF-7,MEL,Neuro-2a,NIH3T3,OVCAR-3,PC-3,PC-12等。
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細胞培養基: | PEI轉染試劑適用于大多數常用細胞培養基,且轉染前后不需要更換培養基,血清的存在不影響轉染效率。
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轉染時細胞密度: | 一般來說,當細胞密度達到60% - 80%時進行轉染可以取得較高的轉染效率。然而,不同細胞的最適轉染密度都不盡相同。因此在初次轉染某種細胞時,可以通過預實驗先確認該細胞最佳的轉染密度。
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轉染質粒純度和濃度: | 用于細胞轉染的DNA應具有較高的純度,且無內毒素殘留(推薦使用無內毒素質粒大提試劑盒進行質粒抽提)。質粒濃度盡量高一些,建議大于500 ng/ul.
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轉染比例: | DNA:PEI = 1:3 1ml細胞培養液,建議使用1 ug-3 ug DNA 和3 ul - 9 ul PEI轉染試劑儲存液。具體根據細胞情況自由調整。
在初次轉染某種細胞時,推薦PEI和DNA的比例為2:1,即1 μg DNA使用2 μl PEI。轉染1 μg DNA所使用的PEI轉染試劑劑量可以在1 - 5 μl之間進行調整以獲得最佳的轉染效率。 |
轉染后細胞培養時間: | 對于絕大多數細胞實驗而言培養24 - 48 h即可,如實驗情況特殊可在12 - 72 h之間進行優化。 |
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